胎盘基底膜铁蛋白受体表达的研究

发布时间 2015-08-21



为探讨铁蛋白受体(FnR)途径是否直接参与铁由母体转运到胎儿的过程,我们对正常健康足月孕妇胎盘基底膜FnR进行了检测,以便进一步研究母婴铁代谢转运的机制。

  材料和方法

   1 研究对象 健康足月孕妇,临产时取静脉血,测定Hb、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、血清运铁蛋白饱和度(TS)及血清铁蛋白(SF)等。参照全国统一的缺铁性贫血诊断标准[1]进行诊断。按照此标准,取Hb>110g/L,不符合铁缺乏且无其它合并症的11名孕妇的胎盘为本研究对象。

  2 实验方法

  2.1 胎盘微绒毛膜和基底膜制备:参照文献[2,3]方法。提取的膜蛋白(Pro)置-20℃保存备用。

  2.2 125碘标记马脾去铁铁蛋白(125I-apo-Fn)制备:采用Bolton-Hunter联结碘标记法[5],所获125I-apo-Fn放化纯>95%,比放射性为204.6kBq/μg.apo-Fn。

  2.3 胎盘基底膜FnR放射配体结合分析:取试管编号为1~10(均作平行管),每管加胎盘基底膜蛋白160μg,125I-apo-Fn 0.1μg,依次加入未标记的马脾去铁铁蛋白(apo-Fn)0~160μg,每管反应总体积为500μl,测总放射性(T)后,置37℃水浴振荡30分钟,然后在冰浴条件下,加4℃预冷的缓冲液0.1ml以终止反应,再加预冷的12%聚乙二醇0.6ml混匀,4℃静置数小时,以4000r/min离心30分钟,弃上清液,测定沉淀的放射性(B)。以未标记的apo-Fn的对数值为横坐标,以B/T为纵坐标,经Scatchard作图,求出每毫克胎盘基底膜蛋白的FnR数量和亲和力常数(Ka)值。

  结果和讨论

  我们曾对胎盘绒毛膜FnR研究发现有FnR表达,表明胎盘可通过FnR-Fn转铁途径摄取铁,以增加胎盘铁贮量,保证对胎儿的铁供应,而我们对11名正常孕妇胎盘基底膜检测未测到FnR表达,说明FnR在胎盘基底膜上含量很少或无表达,胎盘中Fn则很少通过FnR-Fn途径转入子体,该结果与国外研究结果相似。

  上述研究表明,FnR-Fn这一铁转运途径主要参与胎盘对铁的摄取,增加胎盘铁贮量,而铁由母体胎盘进入子体可能并不通过或很少通过FnR-Fn途径转运,而是通过其它途径(如已知基底膜上有TfR表达,铁由Tf-TfR等途径)进入子体。

 

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